什么是荧光显微镜?
荧光显微镜是利用激光、超高压汞灯或氙灯作为光源来观察物体中荧光物质荧光的装置。普通光学显微镜使用卤素灯的可见光作为光源来照亮物体并观察反射光和透射光。
荧光显微镜是显微镜的一种,其主要观察对象是用发出荧光的物质标记的生物组织和细胞。显微镜的分辨率取决于所用光的波长,因此使用短波长光的荧光显微镜具有卓越的空间和时间分辨率。
因此,可以获得高度定量的信息。荧光显微镜变得越来越复杂,例如共焦激光显微镜和多光子显微镜,并且变得越来越重要。
荧光显微镜的应用
荧光显微镜主要用于生物成像。具体目标是细胞和组织,也可以在它们活着的时候进行观察。为了对目标进行荧光标记,需要结合使用以下技术:
- 通过基因重组等对特定蛋白质进行荧光标记的技术。
- 使用荧光标记化学品标记核酸等的技术
- 在特定细胞中表达荧光蛋白的技术
这些技术使我们能够观察目标蛋白和表达基因的定位。此外,还开发了针对特定物质发出荧光的药物和蛋白质,使得神经活动和细胞内物质动态的可视化成为可能。
近年来,CRISPR技术的出现使得创建转基因生物变得更加容易,并且其应用范围正在迅速扩大。
荧光显微镜原理
荧光显微镜是观察荧光的装置。当荧光物质吸收特定的光作为能量(激发光)并再次释放能量时,就会发出荧光。
激发光照射后立即发光。荧光的波长比激发光的波长长,并且这些波长根据荧光团而变化。荧光显微镜具有由以下部件组成的滤光器单元,用于观察特定的荧光。
- 传输来自光源的激发光的滤光片
- 允许发射的荧光通过的滤光片
- 防止激发光干扰荧光的镜子
通过更换或组合滤光片单元,可以从同一样本中观察到多种荧光物质。